Determinación de minerales en suero e hígado y actividad enzimática en sangre, relacionados con la deficiencia de cobre en bovinos
Cseh, S., Soler, J., Moore, D.y Drake, M.- 1INTA Balcarce
Introducción
El cobre (Cu), a través de su rol como cofactor de distintos sistemas enzimáticos tiene una importante variedad de funciones biológicas en los animales. La mayor parte del Cu sérico está unido a la ceruloplasmina oxidasa, (Cp) (Ec 1.16.3.1) la cual actúa como proteína transportadora. Otra enzima que tiene al Cu como cofactor, es la superóxido dismutasa (SOD), (Ec 1.15.1.1) cuya función es actuar como antioxidante protegiendo a las células del daño provocado por radicales libres. Cuando se estudia la deficiencia de Cu, una de las mayores dificultades es seleccionar un indicador práctico que pueda ser usado para evaluar el verdadero nivel de Cu del organismo. El hígado, se sabe, es el mejor, pero posee ciertas limitantes en cuanto a su muestreo y posterior procesamiento. La SOD, ha sido señalada por algunos autores como un indicador más veraz que aquellos valores surgidos de la determinación del Cu sérico total o de la actividad de la Cp. El objetivo del presente trabajo fue determinar la concentración sanguínea y hepática de Cu, hierro (Fe), zinc (Zn) y molibdeno (Mo), y la actividad en sangre de la Cp y SOD en bovinos deficientes en Cu.
Materiales y métodos
Se trabajó con sangre e hígado de 66 bovinos obtenidos en matadero. De cada animal fueron muestreados aproximadamente 100g del lóbulo derecho del hígado. El material fue secado en estufa a 60º hasta peso constante. Luego de mineralizarlo por vía húmeda, se cuantificó el contenido de Cu, Fe, Zn mediante espectrofotometría de absorción atómica (EAA). Por otro lado, el contenido de Mo, fue determinado por colorimetría. A partir de muestras de suero se dosó Cu, Fe y Zn por EAA. Así mismo en las muestras de suero sanguíneo se determinó la actividad de Cp. Para ello se usó como sustrato la p-fenilendiamina, incubándose a la enzima a 37ºC durante 1 hora a pH = 6.3. A partir de las muestras de sangre heparinizada, las cuales fueron centrifugadas 15 minutos a 3500 rpm, se separaron los glóbulos rojos, los cuales luego de ser lavados tres veces en medio isotónico fueron hemolizados. En este material, previa dilución, se estimó el delta de actividad de la SOD por minuto, a 37º , pH =7, usando como sustrato la xantina. La actividad de esta enzima se expresó, en cada caso, por gramo de hemoglobina
Resultados
Los valores de Cu en hígado, indican que los animales presentaban hipocuprosis. Las concentraciones de Fe y Zn en suero sanguíneo e hígado están dentro de los parámetros normales. Los resultados obtenidos muestran que existe una correlación positiva entre la concentración de Cu sanguíneo total, la actividad de Cp (r = 0.92, p<0.0001) y la actividad de SOD ( r = 0.36, p<0.005). También se encontró una correlación entre Fe y Zn en suero (r = -0.26, p<0.05). En hígado se obtuvieron las siguientes correlaciones Cu-Mo (r = -0.29, p<0.05), Zn-Fe (r = 0.51, p<0.001). Entre Fe en hígado y suero, se detectó un (r =-0.34, p<0.005). Sin embargo no se encontraron correlaciones entre Cu total y Cp en suero versus Cu en hígado y SOD en sangre versus Cu en hígado.
Discusión y conclusiones
La falta de correlación entre el Cu hepático y sanguíneo confirman que el mejor indicador para detectar deficiencia de Cu es la concentración de este oligoelemento en hígado. La correspondencia entre los valores de la actividad de Cp y Cu sérico total coinciden con la bibliografía, la cual establece que entre un 90-95% del Cu total se encuentra unido a la Cp. Finalmente, la baja correlación encontrada entre la actividad de la SOD y la concentración de Cu sérico total, sumado a la falta de concordancia con los valores de Cu hepático, sugeriría que esta enzima no aportaría, según nuestros resultados, mejores elementos de diagnóstico para la identificación de la deficiencia de Cu que los parámetros tradicionalmente estudiados.
Bibliografía
-Arthington, J.D., L. R. Corah and F. Blecha. 1996. The effect of molybdenum induced copper dificiency on acute phase protein concentrations, superoxide dismutase - activity, leukocyte numbers, and lymphocyte proliferation in beef heifers inoculated with bovine herpesvirus. J. Anim.Sci. 74: 211-217.
-Badiei,K. And M. Darboui. 1999. Measurement and correlation of liver, kidney and plasma copper concentration and haemoglobin in Holstein cows. J. Appl. Anim. Res. 15: 131-136.
-Mulryam, G. and J. Mason. 1992. Asessment of liver copper status in cattle from plasma copper and plasma copper enzymes. An. Rech. Vet. 23: 233-238.
-Vermunt, J.J. and D.M. West. 1994. Predicting copper status in beef cattle using serum copper concentration. New Zealand Vet. J. 42: 194-195.
-Zxim, D.F., R.W., Waterman and J. Harman. 1991. Effects of copper status on neutrophil function, superoxide dismutase, and cooper distribution in steers. J. Dairy Sci.
